Högpresterande vätskekromatografi ( HPLC ) är en vanlig metod för lab analys , i vilken ett prov separeras i sina kemiska beståndsdelar som är passerar genom en kolonn . Kolonnen fylls med en porös packning typiskt baserade på behandlad silikagel. En standard omvänd fas kolonn , såsom en C8 , kan ibland bli igensatta eller förorenade . Sådana kolumner kan ofta regenereras med hjälp av några enkla tekniker . Saker du behöver
HPLC instrument
Vatten
Metanol
Acetonitril
Isopropanol
Metylenklorid
Hexan
Visa fler instruktioner
regenerera en kolumn
1
Lossa sotigt kolumnen och ändra sin ståndpunkt , så att den mobila fasen nu går in i vad som är normalt utloppet från kolonnen . Bifoga en exit linje till den andra änden av kolonnen ( slutet som var ursprungligen inloppet ) , och köra detta i en avfallsbehållare .
2
Pump genom en serie av lösningsmedel i avtagande polaritet . En grundläggande rekommenderade serie är att börja med metanol , sedan gå vidare genom acetonitril, acetonitril /isopropanol ( 75:25 ) , isopropanol, metylenklorid och hexan. Om den mobila fasen ursprungligen sitter i kolonnen var en buffert , bör en tvätt med vatten föregå metanol . En flödeshastighet av 1 till 2 ml per minut är typiskt lämplig , och cirka 10 kolonnvolymer av varje lösningsmedel bör pumpas genom . Kolonnvolymen är det inre utrymmet inte tas upp av packning och beräknas som ( 0,7 x pi x ( ID /2 ) ^ 2 x L ) , där ID är kolumnens inre diameter och L är dess längd .
Billiga 3
Pump ytterligare 10 kolonnvolymer isopropanol genom kolonnen för att förbereda den för användning med den ursprungliga mobila fasen . Om den ursprungliga mobila fasen buffrade , även pumpa vatten genom kolonnen efter isopropanol innan han återvände till den ursprungliga buffrad rörlig fas .
4
Koppla ur kolonnen och vända och anslut den så att den är i sin normala konfiguration (det vill säga med den rörliga fasen pumpas in i kolonnens inlopp ) . Återanslut utloppet av kolonnen till detektorn .
